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        如何用TL2020組織研磨破碎儀研磨內(nèi)臟及腫瘤細(xì)胞提取RNA
        點(diǎn)擊:14292 添加時(shí)間:2015-05-19 10:38:00 信息來(lái)源:鼎昊源科技

        鼎昊源科技通過(guò)大量樣品破碎測(cè)試發(fā)現(xiàn),動(dòng)物組織樣品相比其他樣品更難破碎,特別是一些內(nèi)臟組織、結(jié)締組織、心臟肌肉組織、肺部組織,一般很難用手工或者常規(guī)組織勻漿儀徹底破碎。因?yàn)檫@些動(dòng)物組織樣品一般韌性較大,如果使用手工研磨或者組織勻漿儀,不僅一次處理量太少、易污染且難清洗,處理后的樣品還不夠均勻細(xì)致,達(dá)不到后續(xù)提取RNA等實(shí)驗(yàn)的要求。20153 - 4月,北京某生物公司研發(fā)人員使用TL2020組織研磨破碎儀(又稱TL2020高通量組織研磨儀)研磨內(nèi)臟及腫瘤細(xì)胞,后續(xù)提取RNA,實(shí)驗(yàn)順利,效果很好,以下是本次研磨實(shí)驗(yàn)的主要流程,可供相關(guān)實(shí)驗(yàn)人員參考:

         

        【材料準(zhǔn)備】

        ·樣品種類:人體腫瘤細(xì)胞、胰腺、前列腺、脂肪、肌肉,每個(gè)組織各研磨2個(gè)樣品,用液氮處理保存。

        ·研磨配件種類:鼎昊源TL2020組織研磨破碎儀2.0ml研磨管適配器(28×2.0ml1對(duì),6mm不銹鋼研磨珠若干顆。

         

        【研磨實(shí)驗(yàn)流程】

        1. 高溫滅菌預(yù)處理6mm不銹鋼研磨珠;

        2. 將滅菌處理過(guò)的研磨珠與研磨管適配器置入液氮中同時(shí)進(jìn)行預(yù)冷處理;

        3. 將樣品從液氮中取出,在研缽中切割成約4-5mm寬的樣品小塊。

        4. 2ml無(wú)菌圓底離心管(進(jìn)口)中依次加入:預(yù)冷6mm研磨鋼珠1顆、切好的樣品塊1塊、預(yù)冷6mm研磨鋼珠1顆。

        5. 確保離心管中有26mm研磨鋼珠和1塊樣品塊后,快速蓋好管蓋,對(duì)稱放入預(yù)冷的2.0ml研磨管適配器孔槽中。

        6. 將適配器固定在TL2020組織研磨破碎儀的兩個(gè)搖臂上,設(shè)置轉(zhuǎn)速1800rpm,時(shí)間120S(胰腺樣品180S),一鍵開始研磨。

        8. 研磨時(shí)間結(jié)束,卸載適配器取出離心管,在管中快速加入裂解液,然后按照后續(xù)RNA提取實(shí)驗(yàn)步驟操作。

         

        【研磨效果】

        ·后續(xù)成功提取出RNA,且電泳圖條帶清晰可見。

        1TL2020組織破碎實(shí)機(jī)照片

        2:離心管中研磨后的樣品

        3:提取的RNA電泳圖

         

        本實(shí)驗(yàn)中,使用TL2020組織研磨破碎儀一次性高速破碎56個(gè)2ml的內(nèi)臟樣品組織,不僅操作靈活方便,還能輕松地進(jìn)行液氮冷凍研磨操作,保證了RNA提取等溫度敏感性后續(xù)實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行。此外,用TL2020進(jìn)行類似的動(dòng)物樣品組織研磨,避免了樣品間的交叉污染,省去了清洗儀器的繁瑣工作,對(duì)于樣品量巨大且需要無(wú)菌操作的實(shí)驗(yàn),無(wú)疑大大升高了效率。

        聲明:本文由鼎昊源科技原創(chuàng),不經(jīng)同意嚴(yán)禁轉(zhuǎn)載抄襲,違者必究!
        聲明:本文由鼎昊源科技原創(chuàng),不經(jīng)同意嚴(yán)禁轉(zhuǎn)載抄襲,違者必究!
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        如何用TL2020組織研磨破碎儀研磨內(nèi)臟及腫瘤細(xì)胞提取RNA 
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