目的：
試驗(yàn)不同樣品量、不同研磨鋼珠大小和不同研磨鋼珠數(shù)量對(duì)新鮮麥苗研磨效果的影響，從而摸索出用TL2020實(shí)驗(yàn)室小型植物粉碎機(jī)進(jìn)行小麥麥苗樣品前處理的合適實(shí)驗(yàn)方案，為后續(xù)有效提取麥苗DNA提供研磨方法。
材料：新鮮小麥麥苗
儀器：主機(jī)，TL2020實(shí)驗(yàn)室小型植物粉碎機(jī)（又名TL2020高通量組織研磨儀，原理是水平震蕩驅(qū)動(dòng)樣品管內(nèi)的鋼珠使其與管壁或者樣品發(fā)生高頻碰撞摩擦從而實(shí)現(xiàn)樣品研磨，和刀片粉碎原理的植物粉碎機(jī)相比，更適合需要精細(xì)研磨的生物及化學(xué)實(shí)驗(yàn)）；配件：2ml研磨適配架,直徑1-8mm研磨鋼珠
步驟：
1）取樣：用打孔器在麥苗上取樣20-30片，或用剪刀將麥苗剪成若干小塊；
2）將小塊/小片麥苗放入一系列2ml EP管中（圓底），部分EP管中放入約0.1g， 部分EP管中放入約1g。其中，在0.1g樣品管里分別置入直徑4-8mm的鋼珠（4mm2-3顆/管，5mm1顆/管，8mm1顆/管）；而1g樣品管中置入1-3顆4mm的鋼球（此時(shí)》5mm直徑鋼球會(huì)造成管內(nèi)擁擠，必然影響研磨效果，故不嘗試）；
3）將以上EP管同時(shí)放入TL2020實(shí)驗(yàn)室小型植物粉碎機(jī)的2ml研磨適配架中，然后將適配架固定在研磨儀的搖臂中；
4）設(shè)置TL2020的研磨時(shí)間為5分鐘，研磨頻率1800rpm（1800次/分鐘）。
結(jié)果：
|
|
|
|
圖1：當(dāng)樣品量過多時(shí)（>0.15g），無論置入1個(gè)，2個(gè)還是3個(gè)直徑4mm的鋼珠，其研磨效果都不理想，有較多塊狀組織。 |
圖2：當(dāng)每個(gè)試管的樣品量為《0.1g左右時(shí)，無論置入1顆直徑8mm鋼珠，或1顆直徑5mm鋼珠，還是2-3顆直徑4mm鋼珠，皆可將麥苗樣品研磨成細(xì)泥狀。 |
結(jié)論：
研磨管中樣品的數(shù)量（重量）對(duì)研磨結(jié)果至關(guān)重要，而研磨珠的大小和數(shù)量對(duì)研磨結(jié)果不是最重要的因素，但大的研磨珠相比小研磨珠的研磨時(shí)間會(huì)縮短，越小的研磨珠研磨的細(xì)度越細(xì)。 樣品體積不得大于試管的1/3。
附：0.1g小麥麥苗的實(shí)際稱重， 可供參考
|
|
|
本文關(guān)鍵詞：植物粉碎機(jī)，小型植物粉碎機(jī)，實(shí)驗(yàn)室小型植物粉碎
| 歡迎您對(duì) TL2020實(shí)驗(yàn)室小型植物粉碎機(jī)研磨新鮮麥苗的試驗(yàn)方法 發(fā)表評(píng)論 |