TL-2010S自動(dòng)研磨儀推出至今，越來(lái)越多用戶體驗(yàn)了其在組織DNA提取中相對(duì)于手工研磨的方便性及高效性，近日我們?cè)?/span>北京某診斷試劑生產(chǎn)企業(yè)研發(fā)實(shí)驗(yàn)室做了一組樣品對(duì)比實(shí)驗(yàn)。

實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/span>

對(duì)比TL2010S中通量自動(dòng)研磨儀與手工液氮法研磨后的新鮮組織樣本在 DNA提取、RNA 提取性能方面的差異，評(píng)估自動(dòng)研磨儀的適用性。

實(shí)驗(yàn)材料及試劑

1.  實(shí)驗(yàn)材料： 將 10 例 FT 樣本分別用吸水紙吸干表面的水分后，稱重后分裝為2 管/例，20 mg±0.3 mg/管。

2.  實(shí)驗(yàn)試劑： 天根DP422 DNA/ RNA共提試劑盒

實(shí)驗(yàn)過(guò)程

1.  研磨

【自動(dòng)研磨】向離心管內(nèi)加入 300 μl 裂解液。將離心管放于液氮中，冷凍處理。

液氮冷凍處理后的離心管固定于自動(dòng)研磨儀適配器中，向離心管中加入 2 粒 3

mm 磁珠。小心將適配器正確安裝至自動(dòng)研磨儀上，設(shè)置研磨參數(shù)： 5 輪循環(huán)數(shù)，60 s/輪，10 s 間隔。啟動(dòng)儀器，研磨組織。研磨后，再向離心管中加入 300 μl 裂解液（裂解液總使用量為 600 μl） 。

【手工研磨】 取樣本放于研缽中，加入液氮后迅速研磨。將組織粉末轉(zhuǎn)移至離心管中，稱重后向其中加入 600 μl 裂解液。

2.  核酸提取、檢測(cè)及保存

將上述分別使用兩種研磨方法處理后的樣本，使用 DNA RNA 共提試劑盒同

時(shí)提取 DNA 和 RNA。使用微量分光光度計(jì)測(cè)定 DNA、 RNA 的濃度及純度。 DNA提取后于-20℃保存，RNA 于-80℃保存。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果

實(shí)驗(yàn)結(jié)論

自動(dòng)研磨儀處理與手工液氮研磨處理后提取 FT 的 DNA、RNA 在濃度、純度上均無(wú)顯著性差異（成對(duì)檢驗(yàn) P>0.05） 。但手工研磨有較大的樣本損失率，對(duì)于DNA提取濃度較低的樣品來(lái)說(shuō)，自動(dòng)研磨儀可以做到樣品0損失，在DNA提取上有著明顯的優(yōu)勢(shì)，且手工處理的過(guò)程復(fù)雜、易交叉污染，操作所用時(shí)間等方面均不及TL2010S自動(dòng)研磨儀，因此自動(dòng)研磨儀對(duì)于DNA提取工作相對(duì)于手工研磨處理有很大優(yōu)勢(shì)。 

本文關(guān)鍵詞：自動(dòng)研磨儀，研磨儀，DNA提取