科研感悟——個人經(jīng)歷的研磨發(fā)展史
點擊：18802 添加時間：2016-12-08 13:15:00 信息來源：昊諾斯
個人經(jīng)歷的研磨發(fā)展史
作者：薛守維
大學(xué)時跟隨李靜師姐做畢設(shè)，做轉(zhuǎn)基因生菜的，那段時間，師姐每周都要很早去附近的菜市場買新鮮生菜。下圖來自網(wǎng)絡(luò)，買的可沒這么干凈，我們最看重的是要新鮮。
在整個實驗里，有個步驟是提取生菜DNA，不管做什么提取，前處理都是至關(guān)重要的，不過當時沒有用任何成品的試劑盒，我和老搭檔郭江田都是用研缽手工破碎的，第一次沒經(jīng)驗，用的是玻璃研缽，就是下面這種（圖片來源網(wǎng)絡(luò)）。
液氮一倒進去就凍裂了，直接七零八碎，光剩一個研磨棒了，可能有沒做過的朋友把研缽和蒸發(fā)皿分不清楚，下圖是玻璃蒸發(fā)皿。
一般在實驗室里做水質(zhì)的不揮發(fā)物質(zhì)檢測用，圓底的，放在水浴鍋上用，需要恒重，所以越輕薄越方便使用，而研缽較厚，外面底部是平的，便于放置在實驗臺上，內(nèi)部底部是圓形的，便于研磨，不易產(chǎn)生死角。
下圖是陶瓷蒸發(fā)皿，一般實驗室不會用到了，因為比較笨重，恒重起來很困難，以玻璃蒸發(fā)皿做對比，玻璃蒸發(fā)皿重量從二十幾克到四十克左右，而陶瓷材質(zhì)的重量多在七十克左右。
好吧，話題有點扯偏了。其實就是把玻璃材質(zhì)和陶瓷材質(zhì)做了個對比，下面登場時陶瓷研缽。
陶瓷研缽優(yōu)點是耐溫差大，液氮溫度是-196攝氏度，實驗室室內(nèi)溫度25攝氏度，直接倒進去不會破壞，倒液氮的目的是在研磨生菜葉片時，迅速降低生菜環(huán)境溫度，使研磨過程出現(xiàn)的水分隨液氮升華掉，最終研磨的成品是粉末狀，如果沒有加液氮，最終出現(xiàn)的就是菜汁了，不利于轉(zhuǎn)移到下一步操作。
當然，并不是所有的材料都適合加液氮，比如蘋果，梨之類的，加液氮可能會形成冰坨狀的硬塊，不利于處理。這樣的應(yīng)該采用切片的方式處理，加液氮處理的一個前提就是樣品要盡量薄，表面積要盡量大，這樣才利于水分逸出，當然，個人認為蘋果做了切片，如果還有必要的話，是可以嘗試加液氮處理的。
下圖是液氮罐，外面一般有個軟質(zhì)的保護套，這東西怕磕碰。
加液氮當時是用一個類似于早些年間走街串巷賣醬油醋酒的勺子，類似下圖，但材質(zhì)是金屬的，且有掛鉤。
整個過程必須確保研缽里一直有液氮，這是研磨成功的保證?；旧弦粋€人負責研磨，一個人負責加液氮，很是費力。兩個人都要戴上厚厚的棉手套，不然按著研缽的手會被凍僵的，時刻不要忘記液氮的溫度是零下一百九十六攝氏度。
后來在藥廠做菌類的DNA提取，那時已經(jīng)比較先進了，用的是成品試劑盒，里面配置了小型的玻璃珠。不如下面的大，那個很小的。
把需要破碎的菌體連玻璃珠一起放入小離心管，震蕩粉碎。比當初的手工研磨算是先進了不少，但如果是做植物組織的，這個方法估計就不適用了。
直到后來，網(wǎng)絡(luò)上接觸的人多了，才知道原來有家專門做研磨前處理的公司，他們產(chǎn)品不光可以減少液氮使用量，而且操作更加簡潔方便。從微生物、植物組織、中草藥、動物肌肉組織、甚至骨骼，都可以順利處理。提取DNA時，可以選用自動組織研磨儀，方便后期離心，不用擔心轉(zhuǎn)移過程中的污染，根據(jù)樣品選擇各種類型尺寸的鋼珠，機器可以設(shè)置間歇研磨，設(shè)置循環(huán)次數(shù)，運行時間，以及轉(zhuǎn)速，整個過程全自動化，不光極大的提高了工作效率，而且利于重現(xiàn)試驗，減少不同人員個體操作影響。想了解下嗎？請記住，昊諾斯。
注：所有圖片均來源于網(wǎng)絡(luò)
作者：薛守維
[ 打印本頁 ] [ 關(guān)閉窗口 ]
新聞點評
| 歡迎您對 科研感悟——個人經(jīng)歷的研磨發(fā)展史 發(fā)表評論 |