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        科研感悟——個(gè)人經(jīng)歷的研磨發(fā)展史
        點(diǎn)擊:18615 添加時(shí)間:2016-12-08 13:15:00 信息來(lái)源:昊諾斯

        個(gè)人經(jīng)歷的研磨發(fā)展史

        作者:薛守維

          大學(xué)時(shí)跟隨李靜師姐做畢設(shè),做轉(zhuǎn)基因生菜的,那段時(shí)間,師姐每周都要很早去附近的菜市場(chǎng)買(mǎi)新鮮生菜。下圖來(lái)自網(wǎng)絡(luò),買(mǎi)的可沒(méi)這么干凈,我們最看重的是要新鮮。 


          在整個(gè)實(shí)驗(yàn)里,有個(gè)步驟是提取生菜DNA,不管做什么提取,前處理都是至關(guān)重要的,不過(guò)當(dāng)時(shí)沒(méi)有用任何成品的試劑盒,我和老搭檔郭江田都是用研缽手工破碎的,第一次沒(méi)經(jīng)驗(yàn),用的是玻璃研缽,就是下面這種(圖片來(lái)源網(wǎng)絡(luò))。


          液氮一倒進(jìn)去就凍裂了,直接七零八碎,光剩一個(gè)研磨棒了,可能有沒(méi)做過(guò)的朋友把研缽和蒸發(fā)皿分不清楚,下圖是玻璃蒸發(fā)皿。


          一般在實(shí)驗(yàn)室里做水質(zhì)的不揮發(fā)物質(zhì)檢測(cè)用,圓底的,放在水浴鍋上用,需要恒重,所以越輕薄越方便使用,而研缽較厚,外面底部是平的,便于放置在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,內(nèi)部底部是圓形的,便于研磨,不易產(chǎn)生死角。
         
          下圖是陶瓷蒸發(fā)皿,一般實(shí)驗(yàn)室不會(huì)用到了,因?yàn)楸容^笨重,恒重起來(lái)很困難,以玻璃蒸發(fā)皿做對(duì)比,玻璃蒸發(fā)皿重量從二十幾克到四十克左右,而陶瓷材質(zhì)的重量多在七十克左右。

          好吧,話題有點(diǎn)扯偏了。其實(shí)就是把玻璃材質(zhì)和陶瓷材質(zhì)做了個(gè)對(duì)比,下面登場(chǎng)時(shí)陶瓷研缽。


          陶瓷研缽優(yōu)點(diǎn)是耐溫差大,液氮溫度是-196攝氏度,實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)溫度25攝氏度,直接倒進(jìn)去不會(huì)破壞,倒液氮的目的是在研磨生菜葉片時(shí),迅速降低生菜環(huán)境溫度,使研磨過(guò)程出現(xiàn)的水分隨液氮升華掉,最終研磨的成品是粉末狀,如果沒(méi)有加液氮,最終出現(xiàn)的就是菜汁了,不利于轉(zhuǎn)移到下一步操作。
         
          當(dāng)然,并不是所有的材料都適合加液氮,比如蘋(píng)果,梨之類(lèi)的,加液氮可能會(huì)形成冰坨狀的硬塊,不利于處理。這樣的應(yīng)該采用切片的方式處理,加液氮處理的一個(gè)前提就是樣品要盡量薄,表面積要盡量大,這樣才利于水分逸出,當(dāng)然,個(gè)人認(rèn)為蘋(píng)果做了切片,如果還有必要的話,是可以嘗試加液氮處理的。
         
          下圖是液氮罐,外面一般有個(gè)軟質(zhì)的保護(hù)套,這東西怕磕碰。

          加液氮當(dāng)時(shí)是用一個(gè)類(lèi)似于早些年間走街串巷賣(mài)醬油醋酒的勺子,類(lèi)似下圖,但材質(zhì)是金屬的,且有掛鉤。


          整個(gè)過(guò)程必須確保研缽里一直有液氮,這是研磨成功的保證。基本上一個(gè)人負(fù)責(zé)研磨,一個(gè)人負(fù)責(zé)加液氮,很是費(fèi)力。兩個(gè)人都要戴上厚厚的棉手套,不然按著研缽的手會(huì)被凍僵的,時(shí)刻不要忘記液氮的溫度是零下一百九十六攝氏度。
         
        后來(lái)在藥廠做菌類(lèi)的DNA提取,那時(shí)已經(jīng)比較先進(jìn)了,用的是成品試劑盒,里面配置了小型的玻璃珠。不如下面的大,那個(gè)很小的。

          把需要破碎的菌體連玻璃珠一起放入小離心管,震蕩粉碎。比當(dāng)初的手工研磨算是先進(jìn)了不少,但如果是做植物組織的,這個(gè)方法估計(jì)就不適用了。
         
          直到后來(lái),網(wǎng)絡(luò)上接觸的人多了,才知道原來(lái)有家專(zhuān)門(mén)做研磨前處理的公司,他們產(chǎn)品不光可以減少液氮使用量,而且操作更加簡(jiǎn)潔方便。從微生物、植物組織、中草藥、動(dòng)物肌肉組織、甚至骨骼,都可以順利處理。提取DNA時(shí),可以選用自動(dòng)組織研磨儀,方便后期離心,不用擔(dān)心轉(zhuǎn)移過(guò)程中的污染,根據(jù)樣品選擇各種類(lèi)型尺寸的鋼珠,機(jī)器可以設(shè)置間歇研磨,設(shè)置循環(huán)次數(shù),運(yùn)行時(shí)間,以及轉(zhuǎn)速,整個(gè)過(guò)程全自動(dòng)化,不光極大的提高了工作效率,而且利于重現(xiàn)試驗(yàn),減少不同人員個(gè)體操作影響。想了解下嗎?請(qǐng)記住,昊諾斯。
         
        注:所有圖片均來(lái)源于網(wǎng)絡(luò)
        作者:薛守維



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