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        TL-2010S自動研磨儀DNA提取適用性評估
        點擊:17339 添加時間:2013-10-16 10:37:00 信息來源:DHS

        TL-2010S自動研磨儀推出至今,越來越多用戶體驗了其在組織DNA提取中相對于手工研磨的便利性,近日我們在北京某診斷試劑生產(chǎn)企業(yè)研發(fā)實驗室做了一組樣品對比實驗。

         

        實驗目的

        對比TL2010S中通量自動研磨儀與手工液氮法研磨后的新鮮組織樣本在 DNA提取、RNA 提取性能方面的差異,評估自動研磨儀的適用性。

        實驗材料及試劑

        1.  實驗材料: 將 10 FT 樣本分別用吸水紙吸干表面的水分后,稱重后分裝為2 /例,20 mg±0.3 mg/管。

        2.  實驗試劑: 天根DP422 DNA/ RNA共提試劑盒

        實驗過程

        1.  研磨

        【自動研磨】向離心管內(nèi)加入 300 μl 裂解液。將離心管放于液氮中,冷凍處理。

        液氮冷凍處理后的離心管固定于自動研磨儀適配器中,向離心管中加入 2 3

        mm 磁珠。小心將適配器正確安裝至自動研磨儀上,設(shè)置研磨參數(shù): 5 輪循環(huán)數(shù),60 s/輪,10 s 間隔。啟動儀器,研磨組織。研磨后,再向離心管中加入 300 μl 裂解液(裂解液總使用量為 600 μl) 。

        【手工研磨】 取樣本放于研缽中,加入液氮后迅速研磨。將組織粉末轉(zhuǎn)移至離心管中,稱重后向其中加入 600 μl 裂解液。

        2.  核酸提取、檢測及保存

        將上述分別使用兩種研磨方法處理后的樣本,使用 DNA RNA 共提試劑盒同

        時提取 DNA RNA。使用微量分光光度計測定 DNA、 RNA 的濃度及純度。 DNA提取后于-20℃保存,RNA -80℃保存。

        實驗結(jié)果


        實驗結(jié)論

        自動研磨儀處理與手工液氮研磨處理后提取 FT DNARNA 在濃度、純度上均無顯著性差異(成對檢驗 P>0.05) 。但手工研磨有較大的樣本損失率,對于DNA提取濃度較低的樣品來說,自動研磨儀可以做到樣品0損失,在DNA提取上有著明顯的優(yōu)勢,且手工處理的過程復雜、易交叉污染,操作所用時間等方面均不及TL2010S自動研磨儀,因此自動研磨儀對于DNA提取工作相對于手工研磨處理有很大優(yōu)勢。 

         

        本文關(guān)鍵詞:自動研磨儀,研磨儀,DNA提取

        新聞點評
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